ФИАЛКИ ТРАВА
Violae herba
WILD PANSY (FLOWERING AERIAL PARTS)
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Собранная в фазу массового цветения и высушенная трава одно- или двухлетнего травянистого растения Viola tricolor L. и/или Varvensis Murr. Содержит не менее 1,5% суммы флавоноидов в пересчете на виолантин в сухом сырье.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)
A. Внешние признаки (#2.8.3). Смесь олиственных стеблей с цветками и плодами разной степени развития и отдельных стеблей, цельных или измельченных листьев, цветков, плодов. Стебли простые или ветвистые, слаборебристые, внутри полые, длиной до 25 см. Листья очередные, обычно черешковые, простые, с двумя крупными перисторассеченны ми или перистораздельными прилистниками; нижние — широкояйцевидные, верхние — продолговатые, по краю тупозубчатые или крупногородчатые, длиной до 6 см, шириной до 2 см. Цветки одиночные неправильные. Чашечки из пяти зеленых чашелистиков. У Viola arvensis чашелистики короче венчика, у Viola tricolor чашелистики длиннее венчика. Венчик из пяти неравных лепестков, нижний крупнее остальных, со шпорцем у основания. Плод — одногнездная, продолговато-яйцевидная коробочка, раскрывающаяся тремя створками. Семена овальные, гладкие. Цвет листьев зеленый, стеблей — зеленый или светло-зеленый, верхних лепестков — фиолетовый с 5—7 темными полосками, темносиний, бледно-желтый или бледно-фиолетовый, средних лепестков — синий или светло-желтый, нижних — желтый или светло-желтый; семян — светло-коричневый. Запах слабый.

B. Микроскопия (#2.8.3). При просматривании листа с поверхности у обоих видов фиалки видны клетки эпидермиса, с нижней стороны более извилистые, чем с верхней; устьица располагаются с обеих сторон и окружены 3—4 клетками эпидермиса (аномоцитный тип). Простые волоски нежнобородавчатые, с толстыми стенками и заостренным концом, располагаются преимущественно на жилках и по краю листа. Железистые волоски с многоклеточной головкой на широкой многоклеточной ножке, встречаются только по краю листа с углублениями между зубцами и на концах зубцов. В мезофилле листа видны многочисленные крупные друзы оксалата кальция. Клетки эпидермиса лепестков имеют сосочковидные выросты. На эпидермисе средних и нижних лепестков (у основания) располагаются длинные одноклеточные тупоконечные волоски с тонкими стенками. На эпидермисе нижнего лепестка при входе в шпорец видны извилистые длинные одноклеточные бугорчатые волоски. В паренхиме нижней части лепестков встречаются друзы оксалата кальция. При измельчении сырья (355) видны: фрагменты эпидермиса листьев, клетки с извилистыми стенками, устьица аномоцитного типа; простые волоски со складчатой кутикулой, с толстыми стенками и заостренным концом; железистые волоски с многоклеточной головкой на широкой многоклеточной ножке. В мезофилле встречаются друзы оксалата кальция. Фрагменты клеток эпидермиса лепестков имеют сосочковидные выросты. На фрагментах эпидермиса средних и нижних лепестков (у основания) имеются длинные одноклеточные тупоконечные волоски с тонкими стенками. На фрагментах эпидермиса нижних лепестков при входе в шпорец видны извилистые длинные одноклеточные бугорчатые волоски. Встречаются фрагменты спиральных и сетчатых сосудов стебля.

(ЕФ) С. Тонкослойная хроматография (2.2.27).
Испытуемый раствор. К 2,0 г измельченного сырья (355) прибавляют 10 мл спирта (70%, об/об) Р. Нагревают в водяной бане при температуре 65°С в течение 5 мин при перемешивании. Охлаждают и фильтруют.
Раствор сравнения. 2,5 мг рутина Р, 2,5 мг гиперозида Р и 1,0 мг кофейной кислоты Р растворяют в 10 мл метанола Р.
Пластинка: ТСХ пластинка со слоем силикагеля Р.
Подвижная фаза: кислота муравьиная безводная Р — кислота уксусная Р — вода Р — этилацетат Р (11:11:27:100, об/об/об/об).
Наносимый объем пробы: по 10 мкл в виде полос.
Фронт подвижной фазы: не менее 12 см от линии старта.
Высушивание: при температуре от 100°С до 105°С.
Проявление: горячую пластинку опрыскивают раствором 10 г/л аминоэтилового эфира дифенилборной кислоты Р в метаноле Р и затем раствором 50 г/л макрогола 400 Р в метаноле Р. Через 30 мин пластинку просматривают в ультрафиолетовом свете при длине волны 365 нм.
Результаты: ниже приведена последовательность зон хроматограмм раствора сравнения и испытуемого раствора. На хроматограмме испытуемого раствора могут обнаруживаться и другие флуоресцирующие зоны.

ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)
Допустимые примеси (#2.8.2). Несырьевые части растения: пожелтевшие листья и стебли — не более 7%; другие части растения (плоды, створки плодов, корни, в том числе отделенные при анализе) — не более 3%. Органические примеси: не более 3%. Минеральные примеси: не более 1%.

(ЕФ) Коэффициент набухания (2.8.4). Не менее 9. Исследуют измельченное сырье (355).

Потеря в массе при высушивании (2.2.32). Не более 14,0%. 2,000 г измельченного сырья (2000) сушат при температуре от 100°С до 105°С.

(ЕФ) Общая зола (2.4.16). Не более 15,0%.

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте (2.8.1). Не более 3,0%.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ (ЕФ) 0,300 г измельченного сырья (250) помещают в колбу вместимостью 200 мл, прибавляют 40 мл спирта (60%, об/об) Р, нагревают в водяной бане при температуре 60°С в течение 10 мин при перемешивании. Охлаждают и процеживают через ватный тампон в мерную колбу вместимостью 100 мл. Ватный тампон с остатками сырья переносят обратно в колбу вместимостью 200 мл, прибавляют 40 мл спирта (60%, об/об) Р и нагревают в водяной бане при температуре 60°С в течение 10 мин при перемешивании. Охлаждают и процеживают в ту же мерную колбу вместимостью 100 мл. Ополаскивают колбу вместимостью 200 мл спиртом (60%, об/об) Р, процеживают и переносят в ту же мерную колбу вместимостью 100 мл. Доводят спиртом (60%, об/об) Р до объема 100,0 мл и фильтруют (раствор А).
Испытуемый раствор. 5,0 мл раствора А помещают в круглодонную колбу и выпаривают досуха в вакууме. Остаток после выпаривания растворяют в 8 мл смеси из метанола Р и кислоты уксусной ледяной Р (10:100, об/об) и переносят в мерную колбу вместимостью 25 мл. Ополаскивают круглодонную колбу 3 мл смеси из метанола Р и кислоты уксусной ледяной Р (10:100, об/об) и переносят в ту же мерную колбу вместимостью 25 мл. Прибавляют 10,0 мл раствора, содержащего 25,0 г/л кислоты борной Р и 20,0 г/л кислоты щавелевой Р  в кислоте муравьиной безводной Р и доводят кислотой уксусной безводной Р до объема 25,0 мл.
Компенсационный раствор. 5,0 мл раствора А помещают в круглодонную колбу и выпаривают досуха в вакууме. Остаток после выпаривания растворяют в 8 мл смеси из метанола Р и кислоты уксусной ледяной Р (10:100, об/об) и переносят в мерную колбу вместимостью 25 мл. Ополаскивают круглодонную колбу 3 мл смеси из метанола Р и кислоты уксусной ледяной Р (10:100, об/об) и переносят в ту же мерную колбу вместимостью 25 мл. Прибавляют 10,0 мл муравьиной кислоты безводной Р и доводят кислотой уксусной безводной Р до объема 25,0 мл.
Через 30 мин измеряют оптическую плотность (2.2.25) испытуемого раствора при 405 нм.
Содержание суммы флавоноидов в пересчете на виолантин в процентах рассчитывают по формуле:

где:
400 — удельный показатель поглощения виолантина;
А — оптическая плотность испытуемого раствора;
m — масса навески испытуемого сырья, г.

ХРАНЕНИЕ
В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.