Государственная Фармакопея (ГФ РБ) Том 2 стр. 343-346. Женьшеня корни.

ЖЕНЬШЕНЯ КОРНИ
Ginseng radices
GINSENG
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Цельные или разрезанные на части высушенные корни (белый женьшень) или обработанные паром и затем высушенные корни (красный женьшень) Panax ginseng C. A. Meyer. Содержат не менее 0,40 % суммы панаксозидов Rg1 (C₄₂H₇₂O₁₄ • 2H₂O; М.м. 837) и Rb1 (C₅₄H₉₂O₂₃ • 3H₂O; М.м. 1163) в пересчете на сухое сырье или не менее 1,0 % суммы панаксозидов в пересчете на панаксозид Rb1 (C₅₄H₉₂O₂₃ • 3H₂O; М.м. 1163) в сухом сырье.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)
(ЕФ) A. Внешние признаки (#2.8.3). Корни стержневые, большей частью цилиндрические, с ответвлениями. Могут быть изогнутыми. Длина корней до 20 см, диаметр до 2,5 см. Поверхность от бледно-желтого до белого с желтоватым оттенком цвета (белый женьшень) или коричневатокрасного цвета (красный женьшень) с продольными морщинами. В верхней части могут быть остатки побегов в виде короны. Излом ровный. На поперечном срезе видна широкая наружная зона с рассеянными смоляными каналами оранжево-красного цвета. В нижней части белого женьшеня имеются многочисленные мелкие корешки, которые обычно отсутствуют в красном женьшене. Запах специфический.

(ЕФ) В. Микроскопия (#2.8.3). При просматривании измельченного сырья (355) (светложелтого цвета) с использованием раствора хлоралгидрата Р видны:    многочисленные фрагменты тонкостенных паренхиматозных клеток и фрагменты крупных секреторных каналов, содержащих смолу желтовато-коричневого цвета; нелигнифицированные трахеиды и частично лигнифицированные сосуды со спиральной или сетчатой утолщенностью, по отдельности или группами; рассеянные друзы оксалата кальция.
При использовании 50 % (об/об) раствора глицерина Р в измельченном сырье (355) видны многочисленные крахмальные зерна, простые или 2—6-сложные, диаметром от 1 мкм до 10 мкм. В красном женьшене крахмальные зерна часто деформированы и разрушены под действием пара или могут полностью отсутствовать.

(ЕФ) С. Тонкослойная хроматография (2.2.27).
Испытуемый раствор. К 1,0 г измельченного сырья (355) прибавляют 10 мл 70 % (об/об) раствора метанола Р. Кипятят с обратным холодильником в течение 15 мин. Охлаждают, фильтруют и доводят метанолом Р до объема 10,0  мл.
Раствор сравнения. 5,0 мг эсцина Р и 5,0 мг арбутина Р растворяют в 1 мл метанола Р.
Пластинка: ТСХ пластинка со слоем силикагеля Р (5—40 мкм) [или ТСХ пластинка со слоем силикагеля Р (2—10 мкм)].
Подвижная фаза: этилацетат Р — вода Р — бутанол Р (25:50:100, об/об/об), используют верхний слой после отстаивания в течение 10 мин. Камеру не насыщают парами подвижной фазы.
Наносимый объем пробы: по 20 мкл [4 мкл] в виде полос.
Фронт подвижной фазы: не менее 10 см [5 см] от линии старта.
Высушивание: на воздухе.
Проявление: пластинку опрыскивают раствором анисового альдегида Р. Нагревают при температуре от 105°С до 110°С в течение 5—10 мин. Просматривают при дневном свете.
Результаты: ниже приведена последовательность зон хроматограмм раствора сравнения и испытуемого раствора.



ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)
(ЕФ) Допустимые примеси (#2.8.2). Сумма допустимых примесей: не более 2%.

(ЕФ) Panax quinquefolium. Просматривают хроматограмму, полученную в разделе «Количественное определение. Определение содержания суммы панаксозидов Rg1 и Rb1». В случае замены корней Panax ginseng на корни Panax quinquefolium на хроматограмме испытуемого раствора отсутствует пик, соответствующий па- наксозиду Rf(рисунок 1).

(ЕФ) Потеря в массе при высушивании (2.2.32). Не более 10,0 °%. 1,000 г измельченного сырья (355) сушат при температуре от 100°С до 105°С.

(ЕФ) Общая зола (2.4.16). Не более 7,0 °%.

(ЕФ) Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте (2.8.1). Не более 1,0 °%.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ
(ЕФ )Определение содержания суммы панаксозидов Rg1 и Rb1. Жидкостная хроматография (2.2.29).
50 г испытуемого сырья полностью измельчают (355).
Испытуемый раствор. 1,00 г измельченного сырья (355) помещают в круглодонную колбу вместимостью 250 мл, прибавляют 70 мл 50 °% (об/об) раствора метанола Р, добавляют несколько кусочков пемзы и кипятят с обратным холодильником на водяной бане в течение 1 ч. Охлаждают, центрифугируют и собирают надосадочную жидкость. Остаток переносят в ту же круглодонную колбу и повторяют экстракцию. Надосадочные жидкости объединяют и выпаривают досуха при пониженном давлении при температуре не выше 60°С. Остаток растворяют в 20,0 мл смеси из ацетонитрила Р и воды Р (20:80, об/об). 2,0 мл полученного раствора разводят смесью из ацетонитрила Р и воды Р (20:80, об/об) до объема 10,0 мл и фильтруют через мембранный фильтр с диаметром пор 0,45 мкм.
Раствор сравнения. 3,0 мг панаксозида Rg1 Р, 3,0 мг панаксозида Re Р, 3,0 мг панаксозида Rf Р и 3,0 мг панаксозида Rb1 Р растворяют в метаноле Р и доводят до объема 10,0 мл этим же растворителем.
Условия хроматографирования:
- колонка длиной 0,125 м и внутренним диаметром 4,6 мм, заполненная силикагелем октадецилсилильным для хроматографии Р с размером частиц 5 мкм;
- температура: 35°С;
- подвижная фаза:
- подвижная фаза А: вода Р, доведенная кислотой фосфорной Р до рН 2;
- подвижная фаза В: ацетонитрил Р;

- скорость подвижной фазы: 1,0 мл/мин;
- спектрофотометрический детектор, длина волны 203 нм;
- время уравновешивания системы: 20 мин перед каждым вводом;
- объем вводимой пробы: 20 мкл.
Порядок выхода пиков: панаксозид Rg1, панаксозид Re, панаксозид Rf и панаксозид Rb1.
Пригодность хроматографической системы: раствор сравнения:
- разрешение между пиками панаксозида Rg1 и панаксозида Re не менее 1,0.

Содержание панаксозида Rg1 и панаксозида Rb1 в процентах рассчитывают по формуле:

где:
S₁ — площадь пика панаксозида Rb1 на хроматограмме испытуемого раствора;
S₂ — площадь пика панаксозида Rg1 на хроматограмме испытуемого раствора;
S₃ — площадь пика панаксозида Rb1 на хроматограмме раствора сравнения;
S₄ — площадь пика панаксозида Rg1 на хроматограмме раствора сравнения;
m₁ — масса навески испытуемого сырья, г;
m₂ — масса навески панаксозида Rb1 в растворе сравнения, мг;
m₃ — масса навески панаксозида Rg1 в растворе сравнения, мг;
Р₁ — содержание панаксозида Rb1 в реактиве, %;
Р₂ — содержание панаксозида Rg1 в реактиве, %.

Определение содержания суммы панаксозидов в пересчете на панаксозид Rb1.
1,000 г измельченного сырья (710) помещают в колбу со шлифом вместимостью 250 мл, прибавляют 50,0 мл спирта (40%, об/об) Р, взвешивают с точностью до 0,01 г и нагревают с обратным холодильником в водяной бане в течение 60 мин. Охлаждают, доводят массу до первоначальной спиртом (40%, об/об) Р и фильтруют (раствор А).
Испытуемый раствор. 2,0 мл раствора А помещают в колбу со шлифом вместимостью 50 мл, прибавляют 1,0 мл раствора 50 г/л кислоты фосфорномолибденовой Р в 96 % спирте Р, 10 мл воды Р и нагревают с обратным холодильником в водяной бане в течение 2 ч. Быстро охлаждают до комнатной температуры. Полученный раствор количественно переносят в мерную колбу вместимостью 50 мл, используя воду Р, и доводят до объема 50,0 мл этим же растворителем.
Компенсационный раствор. 2,0 мл спирта (40 %, об/об) Р помещают в колбу со шлифом вместимостью 50 мл, прибавляют 1,0 мл раствора 50 г/л кислоты фосфорномолибденовой Р в 96 % спирте Р, 10 мл воды Р и нагревают с обратным холодильником в водяной бане в течение 2 ч. Быстро охлаждают до комнатной температуры. Полученный раствор количественно переносят в мерную колбу вместимостью 50 мл, используя воду Р, и доводят до объема 50,0 мл этим же растворителем.
Измеряют оптическую плотность (2.2.25) испытуемого раствора при 730 нм.
Содержание суммы панаксозидов в пересчете на панаксозид Rb1 в процентах рассчитывают по формуле:

где:
193 — удельный показатель поглощения продуктов реакции панаксозида Rb1 с кислотой фосфорномолибденовой;
А — оптическая плотность испытуемого раствора;
m — масса навески испытуемого сырья, г.

ХРАНЕНИЕ
В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.