Государственная Фармакопея (ГФ РБ) Том 2 стр. 444,445. Череды трава.

ЧЕРЕДЫ ТРАВА
Bidentis herba
BUR MARIGOLD*

ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Собранная в фазу бутонизации и начала цветения, высушенная трава однолетнего травянистого растения Bidens trapartita L. Содержит не менее 3,5 % полисахаридов в пересчете на сухое сырье.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)
A. Внешние признаки (#2.8.3). Олиственные стебли и их кусочки, цельные или измельченные листья и цветочные корзинки. Листья супротивные, на коротких сросшихся основаниями черешках, срединные — 3—5-раздельные с ланцетовидными пальчатыми долями, верхушечные — цельные, широколанцетные, длиной до 15 см. Стебли округлоовальные, продольнобороздчатые, толщиной до 0,8 см. Соцветия — корзинки диаметром от 0,6 см до 1,5 см. Наружные листочки обвертки в количестве 3—8, зеленые, удлиненноланцевидные, опушенные по краю, равные или в два раза превышающие корзинку. Внутренние листочки обвертки более короткие, удлиненноовальные, по краю пленчатые, коричневато-желтые с многочисленными темно-фиолетовыми жилками. Цветки мелкие, трубчатые с двумя зазубренными остями вместо чашечки. Цвет листьев зеленый или коричневато-зеленый, стеблей — зеленый или зеленовато-фиолетовый, цветков — серовато-желтый. Запах слабый.

B. Микроскопия (#2.8.3). При просматривании листа с поверхности виден эпидермис верхней и нижней стороны с извилистыми стенками. Устьица многочисленные, окружены 3—5 клетками эпидермиса (аномоцитный тип). По всей пластинке листа встречаются простые гусеницеобразные волоски с тонкими стенками, состоящие из 9—18 клеток, иногда заполненных коричневым содержимым; на нижней клетке волоска хорошо выражена продольная складчатость кутикулы. По краю листа и жилкам встречаются простые волоски с толстыми стенками и продольной складчатостью кутикулы, состоящие из 2—13 клеток. У основания таких волосков лежат несколько клеток эпидермиса, слегка приподнимающихся над поверхностью листа. Вдоль жилок проходят секреторные ходы с красновато-коричневым содержимым, особенно хорошо заметные по краю листа.

C. Тонкослойная хроматография (2.2.27).
Испытуемый раствор. 1 г измельченного сырья (500) помещают в колбу со шлифом вместимостью 50 мл, прибавляют 10 мл спирта (70 %, об/об) Р и нагревают с обратным холодильником в водяной бане в течение 20 мин при периодическом перемешивании. Охлаждают и фильтруют через бумажный фильтр.
Раствор сравнения. 5 мг рутина Р и 5 мг кверцетина Р растворяют в 10 мл 96% спирта Р.
Пластинка: ТСХ пластинка со слоем силикагеля Р.
Подвижная фаза: этилацетат Р - кислота уксусная ледяная Р - вода Р (5:1:1, об/об/об).
Наносимый объем пробы: по 5 мкл в виде полос.
Фронт подвижной фазы: не менее 8 см от линии старта.
Высушивание: на воздухе.
Проявление: пластинку опрыскивают раствором 20 г/л алюминия хлорида Р в 96% спирте Р, нагревают в сушильном шкафу в течение 2—3 мин при температуре от 100°С до 105°С и просматривают в ультрафиолетовом свете при длине волны 365 нм.
Результат: ниже приведена последовательность зон хроматограмм раствора сравнения и испытуемого раствора. На хроматограмме испытуемого раствора могут обнаруживаться и другие зоны.

ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)
Допустимые примеси (#2.8.2). Несырьевые части растения: пожелтевшие, побуревшие и почерневшие части растения — не более 8 %; стебли, в том числе отделенные при анализе, — не более 40 %. Органические примеси: не более 3 %. Минеральные примеси: не более 1 %.
Потеря в массе при высушивании (2.2.32). Не более 13,0 %. 2,000 г измельченного сырья (2000) сушат при температуре от 100°С до 105°С.
Общая зола (2.4.16). Не более 14,0 %.
Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте (2.8.1). Не более 3,0 %.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ
10,00 г измельченного сырья (500) помещают в колбу вместимостью 500 мл, прибавляют 100 мл воды Р и кипятят с обратным холодильником в течение 30 мин при периодическом перемешивании. Выдерживают до оседания частиц и собирают надосадочную жидкость. Экстракцию повторяют еще четыре раза с использованием воды Р порциями по 100 мл. Водные извлечения объединяют и центрифугируют при 5000 об/мин в течение 10 мин. Всю надосадочную жидкость процеживают через ватный тампон и доводят водой Р до объема 500,0 мл. 25,0 мл полученного раствора помещают в центрифужную пробирку, прибавляют 75 мл 96% спирта Р, перемешивают, подогревают в водяной бане при 60°С в течение 5 мин. Через 30 мин содержимое центрифугируют при 5000 об/мин в течение 30 мин. Надосадочную жидкость фильтруют под вакуумом через высушенный при температуре от 100°С до 105°С до постоянной массы стеклянный фильтр (ПОР 16) диаметром 40 мм. Осадок количественно переносят на фильтр и промывают 15 мл смеси из 96 % спирта Р и воды Р (3:1, об/об). Фильтр с осадком высушивают сначала на воздухе, затем при температуре от 100°С до 105°С до постоянной массы.
Содержание полисахаридов в процентах рассчитывают по формуле:


где:
m₁ — масса фильтра, г;
m₂ — масса фильтра с осадком, г;
m — масса навески испытуемого сырья, г.

ХРАНЕНИЕ
В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.